qPCR体系加多少cDNA,qpcr实验cDNA用量

qPCR体系加多少cDNA,qpcr实验cDNA用量

每个标记至少运行3个孔（反应系统），并且通常将2ul的cDNA添加到每个反应系统中。因此，总共需要3x2xn=6nul的cDNA。 计算到这里，你会发现其实你需要先解决问题[1]，但要注意单位换算。例如，你需要反转2微克，而样本RNA浓度是500纳克每微升，所以你需要添加4微升，然后用水补充

注意：cDNA原液的添加量不能超过qPCR反应体系的1/10。例如，对于20μl的qPCR反应体系，cDNA原液最多只能添加到2μl。如果超过体系的1/10，则会对qPCR反应产生抑制作用。有的朋友看到​​这里可能是1ug，20uL反转录体系，80uL水，100倍稀释，1ug，20uL反转录系统，80uL水，梅艳暴龙100倍稀释。稀释后，20ul系统中应加入多少？如果之前稀释5倍，添加

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2.假设cDNA使用前已用水稀释10倍（20μlcDNA加入180μlddH2O稀释至200μl），按照下表将样品添加到qPCR反应系统中：3.样品添加完成后，盖上封口膜并离心。下表所示为1000机通用qPCR反应系统。 第一链cDNA根据需要稀释5-10倍。 混合方法：将各基因（包括实验组和对照组）的Mix、引物和H2O预先混合，然后分装到EP管中，每管mμL，每管加入nμLcDNA模板。