qpcr复孔可用只有两个吗,qpcr三个复孔结果不一样

qpcr复孔可用只有两个吗,qpcr三个复孔结果不一样

一般情况下，设有三个多孔。 极少具有统计显着性。 样品太多，浪费。 因此，一般情况下，设置三个多孔。 PCR如何计算值？ CT值是荧光定量计算公式的简化形式，用于比较不同样品之间的差异或变化比例。 Ct=-1/lgq在PCR中为一个反应做三个重复孔并进行三个生物重复是否正确？ 首先，qPCR不是很准确，尤其是对于新手来说。 其次，只有三个或更多平行才能具有统计意义，并且三个以上的生物重复才能具有统计意义。

仅用两个生物无法重复。 每个反应必须有三次技术重复，这是绝对不可缺少的。 一般来说，处理需要生物复制品，并且我们通常有两个。 至于重复实验，一般需要三次，具体取决于qPCR试剂盒、引物（目的基因、内参基因）、NucleaseFreeWater、10ul移液器吸头、2.5ul移液器、10ul移液器。 2.首先设计待测基因和样本以及实验记录簿中的采样方法。每个样本的每个基因

由于同一系统首先进行预混合，因此取三个平行样品。 因此，如果两者差异不大，则删除误差较大的一个，每组5个样本。每个样本同时检测Bax和36B4的表达，同时需要两个重复孔，即每组5个样本。 5(样本数)*2(基因数)*2(重复孔数)=20孔2.计算步骤计算重复孔的平均值，即每个

可能原因：只有引物二聚体，没有目标条带；或者扩增片段太短。 解决方法：检查是否添加模板；进行琼脂糖电泳检测，确定条带大小是否正确。 6.双峰，下峰T错误在80度之前。可能原因：由于模型的正常值范围是20-35，如果不可能，可以在初步实验中设置两个重复孔。重复孔之间的差异不应超过0.5。沉东喜先生2022-07-06可能对CT值有帮助QPCR在15-30之间。也可以设置两个重复的孔。这主要取决于你在做什么。

Qpcr(1)1.评估数据CT值计算要求15~35，至少2个重复孔，且重复孔之间的差异不能太大，SD<0.05。 Tm值应一致且尽可能单一，表明扩增特异性良好。 扩增曲线，好的扩增曲线呈"S"形，如下图所示。还可以看出，重复孔间重复性差一般有以下两种情况：（1）CT值很大，如CT≥30，重复性较差。 这是正常现象。 这种现象符合泊松分布，即当有效模板量很小时，模板与引物的碰撞是随机的，直接导致重复孔间CT值的差异。