pcr产物测序需要多少ul,胶回收测序需要多少ng

pcr产物测序需要多少ul,胶回收测序需要多少ng

Relatedexperiments:Cyclesequencing:DideoxysequencingexperimentsusingPCRandprimerendlabelingFutureL04X2023-08-14IwanttosendthePCRproducttoasequencingcompany,buttheotherpartyaskedmetoprovidethefollowingthings:PCRproduct10ulC)PCRproduct:PleaseprovidetheelectrophoresisgelpatternwiththesampletoconfirmthatthePCRproductisasingleamplificationbandbeforeprovidingit. 如果提供纯化的PCR产物，条带必须是单一的，OD260/OD280=1.8-2.0，并且最好溶解在无菌去离子水中。 需要集中注意力

PCR产物：1.样品检测标准：上样3-5ul样品，琼脂糖电泳鉴定，呈清晰可见的单条亮带。 2.小​​于150bp的样本，电泳检测呈弥散或多条带样本，非单条带样本不予接受，建议进行克隆测序。 3.未纯化第2部分：测序样品制备第1步反转录第2步PCR扩增第3步产品纯化第4步扩增产物荧光定量第5步向不同实验样品添加适配器第1部分：核酸提取标准操作程序1、COVID-19核酸检测前的准备

附DNA测序样品要求：测序样品要求1.PCR原液·片段通常大于200bp；·提供浓度大于50ng/u且体积大于50ul；·2ul电泳检测带清晰无污染物。 2.PCR已纯化·PCR产物溶解于PCR缓冲液中。一般PCR缓冲液为10×，使用时最终浓度为1×。 例如，在25ul系统中，应添加2.5ul的10×PCRBuffer。 另外，使用时应注意是否添加Mg2+，如果没有则需要单独添加。

主要看PCR产物的量。纯化的产物一般需要500ng以上，未纯化的产物需要1ug以上。这个量是一般情况，也要看你的产物的长度。如果短，可以少，如果长，可能需要多发。 对于某些产品来说，50-80ng足以满足您的1KB产品测序需求，该测序量会根据片段大小成反比减少。 8DarkCircles8(2011-10-1212:24:37)我记得如果PCR产物大于500bp，就不能直接测序，需要克隆成载体然后使用。