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抗体效价是否有必要查 |
elisa测抗体效价结果怎么看,抗体效价测定
可能原因:1)试剂盒未妥善保存而过期;2)HRP酶被污染,导致活性和滴度降低;3)实验操作错误。 例如:将生物素化抗体工作液和酶联工作液的添加顺序颠倒;4)订购多个指标,实际上是3)用洗涤液PBST[含0.05%Tween-20(pH7.4)的PBS]平板洗涤3次。此时用抗体稀释液(含1%BSA的PBS缓冲液,pH7.4)对高免阳性血清进行连续1:2稀释,得到高免阳性血清。测试和空白阴性血清从1:500开始。 点击图片进行分割
如果没有光度计(读板机)只能靠目视判断,那么阴阳的判断主要靠经验。 ELISA领域常用的结果测定方法有:1.定性测定结果测定是在免疫酶技术基础上发展起来的一种新型免疫测定技术,用于测定待测标本中是否含有待测抗原抗体。 ELISA过程包括将抗原(抗体)吸附在称为包被的固相载体上,加入待测抗体(抗原),并加入相应的酶。
反复冻融会导致抗体滴度下降,因此抗体检测血清标本如需保存多次检测,应小量包装并保存。 保存血清时,采集时应注意无菌操作,也可根据试剂盒说明书要求添加适当的防腐剂。11.结果解释:若待测孔OD值>0.1,且大于阴性对照孔的2.1倍(P/N>2.1),其中P为待测血清在一定稀释倍数下的OD值,N为阴性对照孔的OD值相应稀释倍数测定的血清),判定为阳性,判定为阳性的血清为
●ω● 用酶标仪在450nm处测定各孔的吸光度(A450),计算阳性血清与阴性血清的吸光度比值(P/N)。当P/N<1.5时,为阴性;当P/N≥1.5且<2.1时,为阴性。 可疑,当P/N≥2.1为阳性时,将阴性血清OD值的2.1倍对应稀释度确定为阳性值,也称Cut-off值。这是实验室科学中常用的方法,用于制备抗体的超免血清稀释度普遍较高,稀释度对应的阴性血清值为
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