qPCR完全没有曲线,qpcr有结果但没曲线

qpcr曲线应该哪样才好 2024-01-04 10:46 255 墨鱼

qpcr曲线应该哪样才好

qPCR完全没有曲线,qpcr有结果但没曲线

荧光定量PCR熔解曲线不存在峰值，因为：一般情况下，每加热一度，都会读取一次信号。当温度达到PCR产物的Tm时，产物解离并增加。曲线的横坐标是温度，纵坐标是荧光信号的变化。 PCR反应开始时没有扩增曲线的原因是扩增效率问题：通过电泳检测qPCR反应产物，观察是否有目标条带。如果没有，则需要逐一检查引物、模板和反应条件；确认

⊙▂⊙ 既然我们想要的是RNA的定量标准，那么标准最好是RNA而不是DNA。但如果你想检测DNA的绝对定量，那么使用质粒是没有问题的。最好直接合成DNA双链qPCR的标准曲线。这是科研良心➣（1）放大曲线没有的可能原因：1.荧光信号采集没有开启。检查程序设置。三步放大程序的信号采集设置在延伸阶段的72°C，两步放大程序的信号采集设置在退火和延伸步骤。 2.底漆降解。可通过PAGE电泳检测

∩▽∩ 7.如果扩增曲线出现向上或向下的尖峰，则可能是仪器故障，建议维修仪器。 8.阴性对照有扩增1）NTCha扩增，可能有两种情况：①Ct>35，熔解曲线Tm值<80℃（一般qPCR产物正常，大小为100-3，qPCR扩增曲线异常，两张图是同样本试剂，曲线不正常，但曲线不同。我问了很多人都没有，我想问一下helpfromthebigboss#PCR#GraduateDaily#实验#生物学#MedicalStudent

在这种情况下，您通常会发现荧光阈值线与放大曲线之间没有交点，因为阈值位置异常，因此仪器显示状态为未确定。如果出现这种情况，如果扩增模板浓度正常，那么大部分原因可能是引物设计不好，建议更换引物。loveliufudan2023-04-18有用，可能有以下原因：样品浓度低：如果你的模板DNA或cDNA浓度很低，那么可能检测不到信号，因此观察不到熔解曲线。建议

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