熔解曲线单峰但在80度之前,溶解曲线峰低于80度

溶解曲线峰值很低是什么原因 2024-01-08 18:45 549 墨鱼

溶解曲线峰值很低是什么原因

熔解曲线单峰但在80度之前,溶解曲线峰低于80度

还可以预测由扩增子内的序列变化引起的曲线的相对变化。这一特性使得suMelt非常适合高分辨率熔解（HRM）等应用。⑤单峰，T低于80度。可能原因：只有引物二聚体，没有目标条带；或扩增片段太短。解决方法：检查是否添加模板；进行琼脂糖电泳检测，确定条带大小是否正确。 ⑥双峰，

3.80℃之前熔解曲线出现单峰问题分析：引物二聚体引起非特异性扩增；解决方法：再次确认是否添加模板；如果引物设计有问题，重新设计引物；特殊情况：空白对照孔中出现此类峰，请检查3.熔解曲线出现单峰，但Tm值在80℃之前。假定不添加模板，仅进行引物二聚体扩增。高分辨率琼脂糖电泳可用于确认或重复实验。 4.有放大曲线但没有熔解曲线，可能是熔解程序设置的原因。

熔解曲线用于验证扩增产物的特异性。如果产物是单条带，则熔解曲线上会出现一个尖峰；如果存在引物二聚体或其他非特异性扩增，则至少会出现两个峰。顶峰。 ABI75007熔解曲线原理。双峰严重，温度在80度以上。可能原因：引物特异性差或交叉污染。解决方案：BLAST检查引物特异性，重新设计引物；在超净工作台上，用移液器单独添加引物，避免交叉污染。 8.其他

≥０≤ 燕再生物科技（上海）有限公司将为您解答：推测不添加模板，仅扩增引物二聚体。进行高分辨琼脂糖电泳3）PCR产物过长：一般采用80-150bp的产物长度3.标准曲线线性关系不好1）加样存在误差：标准不显示梯度。 2）标准品的降解：应避免标准品的反复冻融。

熔解曲线常用于判断qPCR结果的特异性。理想的熔解曲线是单峰。异常的熔解曲线可能包括杂峰、双峰、宽峰等，下面我们一一分析。 1.熔解曲线出现双峰1)图1显示了两个不同扩增子的熔解曲线。从CFTR外显子17b观察到的单峰（图1A）通常被解释为代表纯的单扩增子。相比之下，来自CFTRexon7的扩增子的熔解曲线（图1B）显示

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