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化学测序法原理 |
化学裂解法测DNA序列,dna序列分析
在DNA提取过程中,应尽可能避免引起DNA断裂和降解的各种因素,以保证DNA的完整性,为后续实验奠定基础。 主要是CTAB法,其他方法有:1.物理法:玻璃珠法、超声波图7-19化学裂解测序法原理(ii)待测DNA的末端标记化学降解法测序首先要制备单侧末端标记的DNA待测DNA片段。 DNA片段的放射性核素标记有以下三种方法:1.利用T4噬菌体多核苷酸
1.2.3化学裂解法的特点和优点:测量的序列直接来源于测量的DNA,避免了DNA复制过程中掺入错误的dNTP。 它可以直接对合成的寡核苷酸进行测序,分析甲基化修饰等,研究DNA和蛋白质化学的二级结构。该方法需要4或5个反应管均匀读取,每个反应管均匀读取。 4个碱基的每个位置有一个碱基,每个位置有对应的片段,有对应的待测片段,可直接读出待测DNA的全序列。
4.常用测序方法1.末端终止法2.化学裂解法3.DNA测序35无论采用哪种方法,基本测序流程如下:1.待测DNA序列模板的制备;2.酶促或化学反应转化为"算术序列"(n=1);3.PAGE;常用的方法有3种DNA序列测定:1.末端终止法是用特异性引物将单链模板DNA退火,在DNA聚合酶的作用下进行延伸反应,用ddNTP终止,并用PAGE区分长度仅相差1个核苷酸的单链DNA,从而完成测序方法。 优势
序列检测:基于杂交的方法、基于测序(聚合)的方法、酶促和化学切割方法基于杂交的方法:P2071)单链构象多态性(SSCP)单链构象多态性:小量制备使用质粒DNA来确定未知序列的DNA克隆,因此不受欢迎高纯度质粒最好通过氯化铯-溴化乙锭梯度平衡超速离心来制备。 其次,应使用高质量的聚合酶。 一次结束
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标签: dna序列分析
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