熔解曲线的含义,定量的溶解曲线乱七八糟

熔解曲线的含义,定量的溶解曲线乱七八糟

∪△∪ 最终，DNA双链完全熔解为单链，荧光值下降至背景水平。此过程中荧光信号随温度变化的曲线就是熔解曲线，称为原始光谱。 熔解曲线的导数光谱是通过将光谱转换为负导数而得到的。导数光谱反映了荧光值的变化，是熔解曲线。 以ABIQ3软件的熔解曲线程序设置为例（见上图）：DNA单链在60℃完全退火形成双链后，温度逐渐升至95℃（升温速率为0.15℃/秒）。 DN

解离曲线：显示DNA双螺旋结构随着温度升高而降解程度的曲线。 总DNA双螺旋结构的一半降解的温度称为解链温度(Tm)。DNA的不同序列有不同的Tm值。 DNA中G-C含量越高，Tm值越高，与关系成正比（熔解曲线定义了总DNA双螺旋结构降解一半的温度，称为熔解温度（Tm）。不同的DNA序列有不同的Tm值。DNA中G-C含量越高，Tm值越高，与关系成正比。

实时荧光定量PCR（QuantitativeReal-timePCR）是指在PCR扩增反应体系中添加荧光基团，通过实时检测扩增反应中各循环产物的荧光信号，最终通过标准曲线对未知模板进行定量分析熔解曲线：在生物化学中，熔解曲线是用来测定核酸序列如双链DNA或RNA的熔点的曲线。 熔点是双链DNA或RNA分子解离成单链分子所需的温度。 生物化学：生物化学是对生物体中分子的研究

解离曲线是显示DNA双螺旋结构随着温度升高而降解程度的曲线。 扩增反应完成后，通过逐渐升高温度来生成熔化曲线，同时监测每一步的荧光信号。 熔解温度下有特征峰（Tm），熔解曲线示例图01熔解曲线为单一尖峰，表明产生非特异性荧光，定量准确。图02熔解曲线中有杂质峰，表明产生非特异性产物，荧光值不能反映目标产物的量，此时定量不准确。