每个marker最少跑3个孔(反应体系),每个反应体系通常加2ul的cDNA, 因此,总共需要:3 x 2 x n = 6n ul 的cDNA。 计算到这里会发现,你其实需要先解决了问题【1】,...
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【方法】 选取16个常用的看家基因作为候选内参基因,设计引物,通过普通PCR、溶解曲线及琼脂糖凝胶电泳验证引物的特异性;通过实时荧光定量PCR及软件geNorm、NormFinder和BestKeeper分...
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依据公式「2△CT=浓度差」可知,△CT=20(预期 CT 值)-10(实际 CT 值)=10,那浓度差=210=1024,也就是说在 cDNA 原液的基础上稀释 1024 倍即可使该处理组GAPDH内参基因的 CT 值达到 20。
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