PCR各种异常扩增曲线,扩增曲线异常的原因

pcr异常曲线分析 2023-12-20 14:23 839 墨鱼

pcr异常曲线分析

PCR各种异常扩增曲线,扩增曲线异常的原因

(｀▽′) ：软件默认基线设置不准确，导致放大曲线异常。解决方法：根据检测试剂的要求设定合适的基线。 03软件优化导致的正常扩增曲线特点：软件优化后，扩增曲线斜向上抬升，导致ct减少。异常扩增曲线分析1.单基因拖尾Ct值大或单基因拖尾Ct值不高，如下图。原因分析：①人为原因：操作不当导致交叉污染，如存在阳性质控、阳性标本过夜、口腔气溶胶穿过采样枪、手脏等

?▂? 1.正常状态扩增曲线正常PCR扩增曲线呈"S"形，分为基线期、指数期、线性期和平台期。放大曲线良好的指标是曲线拐点清晰、放大曲线整体平行度好、基线平坦、不平行。1.放大曲线形状异常。放大曲线不平滑：信号太弱，系统校正后产生信号。增加模板浓度重复实验。 .扩增曲线断裂或下降：模板浓度高，基线终点值大于Ct值。减少基础

˙﹏˙ 耗材对于荧光定量PCR来说非常重要，很多扩增曲线异常都是由于耗材使用不当造成的。常见的耗材相关问题包括：1）普通PCR仪器耗材的误用。普通PCR耗材一般透光率较差，可能会导致1、首先我们看一下普通的PCR扩增曲线，是比较平滑的S形曲线。，见下图：2.常见异常结果分析2.1案例12.1.1现象：常见单基因尾部大Ct值和单基因尾部无Ct值，见下图：2.1.2

●△● 耗材对于荧光定量PCR来说非常重要，很多扩增曲线异常都是由于耗材使用不当造成的。常见的耗材相关问题包括：1）误用普通PCR仪器对应的耗材。普通PCR耗材一般透光率较差，1）稀释模板重新扩增。 2）检查试剂，更换新试剂，进行双试剂检测。 7.扩增曲线前端下降，后端正常原因：（1）PCR初期，试剂与模板混合不充分，导致信号不稳定，出现多次反应。

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标签：扩增曲线异常的原因