qpcr复孔差距多少可以接受,pcr复孔之间不能超过

qpcr复孔差距多少可以接受,pcr复孔之间不能超过

扩增曲线得到的Ct值是判断实验成功与否的重要参考，Ct值有一定的可信度范围，一般建议阳性结果（科研）调整在15-30之间，阴性对照Ct>35，内参基因一般小于20，样本间内参Ct值差异不大不超过我们的，我们有三个重复，但是组里有三个重复，兄弟说相差小于0.5，所以可以删掉|喜欢回复momo2023-07-0620:38:27江苏的三个复杂的洞，我会看曲线，剔除不正常的。 一

ˇ▽ˇ 5.qPCR基因信息：基因数据库查询、目的核酸结构（如RNA的干环结构）、目的基因长度；引物信息：序列及浓度、结合位点；染料探针：染料类型、探针序列等；实验设计：内参基因的选择。气泡会导致荧光减少，或者与图2中的曲线相结合，可能存在仪器问题。

有帮助的QPCR的CT值可以在15-30之间，也可以设置两个重复的孔。这主要取决于你想要什么。 多个孔之间的差异不超过1，这是一个更可信的结果。 balalaLy2022-07-06如果有帮助，一般在35以内。如果太高，则难以置信。 该工具只能设置两个副本。它基于微软的EXCEL和VBA。每组实验中的样本数量、基因数量和平行实验数量没有限制（如果您有三个重复孔，其中一个的CT与其他两个非常不同，则可以删除该孔。有的组有3个化合物孔，有的有2个。不影响过程。

当我开始做qPCR时，重复的孔之间有很大的间隙。我检查了很多原因，发现注射细节有错误。 希望对您有帮助！ 2022-09-14IP北京转到App查看核酸基因技术63.2重复性孔重复性差异一般出现以下两种情况：（1）CT值很大，如CT≥30，重复性差是正常的。 。 这种现象符合泊松分布，即当有效模板量很小时，模板与引物之间的碰撞是随机的。

我们遇到的问题是样本间内参的表达（内参的Ct值）不统一，请看下图（这是内参在不同样本中的相对表达，可以看出内参的表达相差10倍左右）。 每个样品的原始qPCR重复孔之间的差异不能超过0.5。如果SD值大于0.5，则需要运行。系统准备好并添加样品。添加系统时最好不要将移液器垂直向上和向下倾斜。如果有，请使用前通道枪，这样会减少误差。