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用于ip的抗体浓度是wb的几倍,完全抗体

co―ip抗体怎么选择 2023-09-02 18:14 632 墨鱼
co―ip抗体怎么选择

用于ip的抗体浓度是wb的几倍,完全抗体

用于ip的抗体浓度是wb的几倍,完全抗体

(注:如果用于WesternBlot(WB)分析,请按照相应的WB操作步骤继续进行实验。建议使用Bioscience的TrueBlotTM,以获得更好的WB结果;WB抗体浓度与免疫沉淀浓度不同,具体情况而定。一般来说,IP实验对抗体的要求比WB更高。为了尽量减少针对抗体非特异性造成的假阳性相互作用识别结果,IP-MS中使用的抗体比传统IP-WB小很多,也会有更高的要求。

一般来说,抗体开发出来后,必须经过WB、IP、IF、IHC实验。 当发现浓度不够用于IF和IHC时,一般将国外抗体写为未检测,国产抗体一般不写。 所以尽量不要用手去尝试。另外,值得注意的是,IP用的抗体和WB用的抗体最好是不同种类的,这样可以有效避免WB检测时重链和轻链的混淆。 干涉。 悄悄告诉你,使用以下二抗可以很好地避免干扰! 3.3选择

1.在IP实验中,抗体需要通过识别抗原的构象表位并与目标蛋白结合来进行沉淀。然而,只能识别线性表位的抗体则无法做到这一点。 因此,在开始IP实验之前,有必要确保所选的抗体适合IP实验。 使用Anti-HA标签抗取决于制造商的抗体以及抗体稀释后的用途。 例如,如果本厂家的WB抗体是1mg/ml抗体,则做WB时一般要求抗体工作液的浓度为1ug/ml,即1m

以下是一些常见的WB抗体浓度范围供参考:一般情况下,建议初步实验使用1:1000-1:5000倍的浓度,并根据实验需要调整浓度。 对于一些背景较高的蛋白,应进行较高浓度,但也有特殊情况,如图1中的Rb(4H1)MousemAb(9309)。该抗体为单克隆抗体,但经过实验验证,发现适合WB、IP、IHC、IF、F、CHIP等所有实验。 推测该抗体的抗原仅含有线性表位

如果使用CST抗体:按照说明书中的稀释比例添加抗体。 以1:50为例,如果细胞裂解液浓度调整为1μg/μl左右,则200μL裂解液中需加入4μl抗体。 其他抗体的使用请参见抗体说明书。 注:设置时,WB/FC的抗体稀释浓度通常为1:1000,IP/IF/IHC为1:100,如果可以做ELISA,可以稀释1:10000。 如果抗体用于ELISA,则意味着抗体滴度不高。 但不是

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标签: 完全抗体

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