coip二抗,蛋白ip实验

coip二抗,蛋白ip实验

2）IP-WB检测到一抗直接标记HRP，WB实验过程中不使用二抗——这样二抗就不会识别CoIP产品中的一抗。 产品推荐：M200系列HRP标签抗体）；3）使用仅识别天然构象抗体的二抗，北京嘉美振源生物技术有限公司生产的免疫共沉淀IP/COIP。1.免疫共沉淀实验技术原理免疫共沉淀（Co-IP）利用抗原蛋白与抗体的特异性结合以及细菌蛋白的"co-IP"。

为了避免实验中重链干扰的问题，艾美杰向您推荐两种解决方案。 一种是分别选择不同物种的一抗进行IP和WB实验，然后选择无物种交叉反应的二抗进行WB实验；捕获抗体和检测抗体来自不同物种，使用检测抗体物种。 特异性二抗；如果可能，使用没有恒定区域的纳米抗体捕获抗体。 受金融资源和市场供给的限制，上述两种解决方案都不是那么容易。

另外，值得注意的是，IP所用的抗体和W所用的抗体最好是不同种类的，这样可以有效避免WB检测时重链和轻链的干扰。 悄悄告诉你，使用以下二抗可以有效避免干扰！ 3.3选择电泳→转膜→封闭→洗膜→一抗孵育→洗膜→二抗孵育→洗膜→显色曝光5.Co-IP结果分析6.Co-IP扩展Co-IP注意事项：①轻度裂解条件②使用定义的抗体③制作

4.转印膜上存在非特异性吸附：戴上手套，使用镊子，不要触摸膜的转印面。 选择不同来源的两种抗体，实验中IP抗体用量较大，会导致55kd抗体重链的信号非常强。 如果二抗是在另一宿主中制备的能够与一抗或一抗片段结合的抗体，则二抗通常根据实验需要附有酶或荧光素等标签。 由于二抗的优点，被广泛应用于免疫实验

此步骤的目的是移动样品中不能与ProteinA/Gagarose珠子非特异性结合的蛋白质，减少干扰。这不是必需的。如果CoIP实验中发现很多混合条带，可以考虑这样做，但要注意。 ，选择此步骤后，需要进行免疫沉淀（ip）实验：CoIP、RIP和CHIP的区别IP实验原理IP，又称免疫沉淀（Immunoprecipitation），利用抗原与抗体的特异性结合和"蛋白A/G"与抗体的FC片段特异性结合的现象进行开发