内参基因CT值多少合适,qpcr内参ct值范围多少合理

内参基因CT值多少合适,qpcr内参ct值范围多少合理

Ct值越低，测试基因或内参基因的相对表达量越高。 一般来说，内参基因的Ct值应在20-30之间，表明其表达水平处于稳定状态。 如果Ct值过低或过高，则表明内参基因的表达水平过高或过低。但不同基因的表达水平差异很大，可达数千甚至数千倍，因此CT值的差异应在10以内。这是正常现象，但通常内参基因是表达水平较高的看家基因。如果目标基因和记忆基因的表达水平（

1⃣️将完整的定量数据复制到定量仪器上，如图2所示，包括基因的ct值和ct平均值。 2⃣️将内参基因的平均值复制到表格底部的空白处，然后将目标基因的平均值复制到表格底部的平均值后面，如目标基因的平均Ct值-内参基因的平均Ct值=ΔCt步骤2：处理与对照样本比较ΔCt处理样本-ΔCt对照样本=ΔΔCt步骤3：利用公开公告计算倍数变化=2-ΔΔCt该公式用于计算所有待测样品和对照

∩ω∩ 模板浓度：模板浓度是决定Ct的最重要因素，应控制在适当的范围内，使C在15-35之间。 反应溶液成分的影响：任何分子的荧光发射都会受到环境因素的影响，例如溶液的pH值和盐浓度。 PCR反应的效率在于相对定量，一般Ct值控制在15-25之间比较好。如果是绝对定量，对于低拷贝数的样品，Ct值会增加，但一般不要超过40个循环，否则定量不准确。 因此，有必要判断Ct值出现过晚是否异常。

我们的扩增曲线的Ct值通常在10-40之间，即30个周期除以3.33，约为9。 那就说明我的CT值太高，说明模板量太高，如果太低，可能是模板量低或者背景太高，这两种情况都会导致结果不准确。一般情况下，内部参考CT值控制在16-18之间，以保证对比。 真实结果