SIP通过抑制BRUCE介导的LC3-I经蛋白酶体降解促进自噬 自噬标志性蛋白LC3-II在自噬过程中起着至关重要的作用。自噬小体形成时,胞浆型LC3-I去掉一小段多肽,转变为自噬小体膜型LC3-II...
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p62在自噬中上调还是下调 |
LC3咋看自噬水平,自噬lc3a和lc3b关系
在"堵漏"的前提下,可以根据一段时间内LC3-II的积累程度以及LC3-II/LC3-I的比例来判断自噬的变化。 一般认为当LC3-II/LC3-I大于1时发生自噬。 当前LC3抗体检测到的抗原表位随后与PE结合并转化为膜型LC3-II。 因此,自噬水平可以通过LC3-II/I比值来估计。
>▽< 检测自噬体膜上结合的自噬体蛋白Atg8及其同系物的表达水平也是常用的自噬检测方法。 Atg8中,LC3B(常称为LC3)最先被发现并得到广泛应用。 当自噬形成时,细胞质LC3(即LC3-I)将图2:小鼠组织/某些细胞中LC3A和LC3的mRNA水平差异(来源:Biogps)LC3的来去是一个动态过程,如简介中所述。 ,LC3-I和II存在生成-降解的动态过程。 自噬体有一个生成、融合、降解的过程
通过适当的控制,可以计算LC3-II点来量化自噬体的数量。 由于自噬发生在所有细胞的基底水平,因此应该测量LC3-II点的数量变化,而不是有LC3-II点的细胞数量的变化。ATG12-ATG5和LC3是自噬体膜蛋白的两个标志,通过Westernblot检测标志蛋白的水平可以判断机体的自噬现象。 但由于ATG12-ATG5在自噬早期只存在于双膜上,而LC3在自噬过程中不起作用。
采用荧光自噬病毒感染细胞。添加自噬诱导剂后,基于红/绿荧光共定位,融合后出现的亮黄色荧光点即为自噬体。 3.WB检测自噬水平主要分为两种:前面介绍的LC3蛋白水平指向自噬的降解,因此,LC3蛋白水平作为公认的评价和测定自噬的指标。当与溶菌酶和自噬抑制剂联用时,可以量化自噬流(自噬的强度)过程在一定时间内发生)。 摘要:在自噬体形成过程中,细胞质定位的LC3-I与PE结合。
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