荧光定量标准曲线制作方法,荧光动力学曲线怎么作图

PCR技术的原理 2024-01-04 10:46 158 墨鱼

PCR技术的原理

荧光定量标准曲线制作方法,荧光动力学曲线怎么作图

(1)选择一个元素并单击计算查看曲线。单击结果可查看有关此曲线的相关信息。相关系数9越高越好，准确度数字越低越好。平衡这两个元素以进行相关校正。 2）标定方法：评价标定反应效率的最佳方法是生成标准曲线。标准曲线是通过构建样品核酸的系列稀释液并进行实时荧光定量PCR生成的。然后以起始核酸量为X轴，C为Y轴绘制结果曲线。用于生成标准曲线

相对定量数据的计算通常有两种方法：相对标准曲线法和比较Ct值法。标准曲线法中，先用标准曲线测定实验样本和对照样本中目的基因和内参基因的含量，然后用内参基因对两个样品中目的基因的含量进行归一化，1μl双链DNA标准品（份数）=（稀释倍数）

3、标准品的制备一般需要四到五个点做一条标准曲线，浓度范围应覆盖样品的浓度范围，以保证定量的准确性。一般一个点重复三到五次。对于长期稳定使用的标准品，可以适当减少重复次数。将基因片段克隆到质粒中，然后在体外转录成RNA。定量后合成cDNA，然后按比例稀释制成标准品。曲线，或者你可以使用质量始终良好的RNA样本，例如细胞系，然后使用它作为标准来制作

后台-插件-广告管理-内容页尾部广告（手机）

标签：荧光动力学曲线怎么作图