pcr和蛋白趋势不一致,有WB还需要做PCR吗

pcr和蛋白趋势不一致,有WB还需要做PCR吗

求助专家：Western蛋白结果与PCRmRNA结果不一致，这正常吗？ 如何解释？ 我用Western检测目的基因的蛋白表达，用PCR检测mRNA的表达，结果是相同因素下目的基因的蛋白表达趋势。WB和PCR反复验证了趋势是下调的。Elisa显示是上调的……我用的是细胞。 超滤、浓缩后测定培养上清液。 目前我们正在考虑两个问题的影响，一个是总蛋白浓度不均匀，下次我们先做。

RT-PCR和WB结果的变化趋势并不总是一致，这可以从以下几个方面来解释：1.基因表达分为转录和翻译两个水平，即mRNA水平和蛋白质水平。 然而，真核基因表达的转录和翻译的不一致导致你的怀疑并且难以解释。 一般来说，从mRNA到蛋白质，这种差异很少出现。至于选择性剪接的可能性，可以仔细查找该基因是否有多重剪接结果。

?＾? 9.意外终止。 这种情况发生在PCR放大序列时，它会让你开个小玩笑。 例如，它将序列中间的TAC突变为TAA，这会破坏你的蛋白质翻译。 因此，必须在表达前进行测序。避免这种情况是正常的。蛋白质合成较多，但降解也较多，因此虽然mRNA水平高，但蛋白质水平低。 mRNA和蛋白质表达水平不一致

↓。υ。↓ 我们可能经常会遇到RNA水平（如PCR）和蛋白质水平（如WESTERN）结果不一致的情况。如果这种情况纯粹基于理论分析（先抛开实验操作等因素），那是什么原因呢？ 这是什么现象。 从细胞生物学的角度来看，蛋白质的任何调控都包括转录、转录后、翻译和翻译后四个方面，因此结果不一致是可能的。 如果药物影响酪氨酸激酶，可能会出现多种情况

我们也遇到了PCR和western结果一致的情况，我们最后重复了实验，还是不同意。但是，蛋白质与RNA有比较大的区别，因此，如果通过PCR和测序鉴定目标序列，确定目标基因在DNA水平上删除了相应的DNA序列，则相应的蛋白质将因缺乏正确的DNA翻译模板而无法合成正确的蛋白质。 WB抗体本身具有确定性