western内参跑不出来,tubulin内参

western内参跑不出来,tubulin内参

磷酸化蛋白检测需要设置两个内参，一个是磷酸化蛋白对应的总蛋白。例如，如果你想检测Akt磷酸化，那么你必须同时运行Akt蛋白和Akt磷酸化抗体，只检测磷酸化蛋白。 蛋白质表达的变化不能用Western内参不能暴露来解释。如果上样量足够，而您的Western操作过程中没有问题，甚至内参也不能暴露，则很可能是抗体的原因，您可以通过这些抗体来消除。 是一抗还是二抗的问题？

WB无法逃脱，你想哭吗？ 对于蛋白质印迹实验来说，三分靠运气，七分靠努力。蛋白质的提取和制备是重中之重。 说实话，我从来没有做过Westernblot，也不敢说是在ResearchMonk学过的。这已经成为很多Westernblot新手的普遍做法。我想问个问题。我选择actina作为内参。结果，伊朗了很多次，每次都获得了目标条带。 它可以用完，但内参不能。我已经改变了一抗浓度，但仍然没有带。我不知道原因。请给我一些建议。

这个系列将持续一段时间，这只是开始。 B站也有提供，欢迎大家留言，一一解答有关免疫印迹成像的常见问题。如果上样量足够，而你的免疫印迹操作过程中没有问题，甚至内参也打不出来，那么很可能是抗体的原因，可以一一排除。 接下来的问题是一抗还是二抗。另一个问题是AB解决方案是否已过期。有两种

这位兄弟说，内参的形状怪异，可能是凝胶制作的问题，凝胶没有足够的时间凝固，可能有杂质，成分不均匀，下次用纯净水清洗玻璃板，然后放入烘箱中，装有凝胶的离心管也必须干燥干净，凝胶已经凝固了。 然后静置半小时，再进行第三阶段电泳，以获得更好的结果。❷小分子蛋白转移液中一定不要添加SDS，因为SDS会影响转移效果；❸小分子蛋白湿转移，请参考100V恒压，或150-200恒流，40-60min，即可跑出结果，也能保证内参效果很好；❹小点

一遍又一遍，所以这是第四次了。这几天我一共做了5次，只有一次是正确的。剩下的四次没有跑掉。将间隙应用到整个影片上如图2.3所示。 应该击败37的差距出现在170以上。 也就是说，ifma，我很好奇大家是怎么调整西方内参的？ 在我告诉你如何冷冻鸡蛋之后（我不知道在哪里点击这里），评论基本上是"我很好奇你如何调整内部参考？"。我可以如何调整它？我会在夏天调整它。 用完内部参考条