做qpcr内参ct值25正常吗,内参CT值在20多能用吗

pcr内参ct值14能用吗 2023-12-28 21:54 408 墨鱼

pcr内参ct值14能用吗

做qpcr内参ct值25正常吗,内参CT值在20多能用吗

╯▽╰ 相对定量时，Ct值一般控制在15-25之间较好。绝对定量时，对于低拷贝数的样品，Ct值会有所增加，但一般不宜超过40个循环，否则定量会不准确。因此，要判断Ct值是否出现异常，需要将实验样本中目标基因的Ct值与对照样本中的Ct值进行比较，得出实验样本中目标基因的量与对照样本中目标基因的量之间的比例差异。表示为倍数。这种方法是最常见的qPCR定量检测mRNA水平的方法，常用于研究生理变化。

一般将某些样本中RPKM值较低的基因称为低表达基因。 qPCR实验结果显示数据的CT值偏大，有时伴有多孔重复性差。CT值大说明同一系统内参基因的CT值正常，应注意上下游引物的浓度比。阴性对照35个循环后出现扩增属正常现象，可通过熔解曲线进行分析。

⊙ω⊙ 检查内参扩增是否正常，如果与其他核酸样本相比CT值较大，可能是核酸添加量少，或者核酸中有抑制剂；如果有外参基因（一般用于监测核酸提取过程，以及PCR反应扩增是否正常），如果扩增正常，则有荧光定量的相对定量计算公式PCR（qPCR）可以通过比较待测基因与内参基因的CT值（荧光信号阈值）来获得。

我的最后一个理由有点可笑。这些姐姐曾经做过一次，也得到了同样的异常CT值。我们现在怀疑这不是小鼠来源的细胞，但qPCR内参ct值在15-25左右，但目标ct值在31左右。 ct值过高如何解决？数据可以用吗？写一个答案并分享3个答案bambooopiggy2022-09-16可以有一个有用的内部参考15-25和目标31，但是数字

生物方向-QPcrCt值：指每个反应管的荧光信号达到设定阈值时所经历的循环次数。每个模板的Ct值与模板初始拷贝数的对数之间存在线性关系。初始拷贝数越大，Ct值越小。实验分为：如果绝对CT值过高，则说明模板量过高；如果过低，则可能是模板量过低或背景过高，这两种情况都会导致结果不准确。一般情况下，内参考CT值控制在16-18之间，以保证对比。真实结果

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