Pcr内参不齐怎么调整,pcr内参之间不能相差多少

Pcr内参不齐怎么调整,pcr内参之间不能相差多少

建议重复实验或改善实验条件以降低不确定度。 3.建议重新评估实验条件，确保试剂纯度，并考虑使用其他内参。 如果问题仍然存在，则可能需要重新设计实验。 各位战友，这位网友太厉害了，最近发PCR，发现两组癌和邻癌的内部参考GAPDH不均匀，16-26CT值不等，所以我改成了新的GAPDH，顺序是GAPDHFFORWARDCTGCACCACCAACTGCTTAGREVERSEGTCT

∩ω∩ qPCR内部参考不均匀br.MousesampleqPCRwastriedonactin18s.ThefirstbatchfactinhadsimilarCqvaluesaround15.The18swereuneven.TheMaxandminreabout2Cq.Thesecondbatchdidnotwork.Whyisthis?RNAconcentrationA260/A280A230/A280None.Yourcase"在做q-rtPCR后，发现内部参考组织的情况不一致，基因趋势与芯片结果经验证相反，请各位指教……"经同行评审，纳入丁香园临床病例数据库。 收藏时间无效日期长按识别

首先检查文章参考文献中使用的内参基因。当没有已知的内参基因时，可以通过内参基因工具网站进行检查：PCR内参基因知识库-ICG（网站http://icg.big.ac.cn/index.php/Main_Page）实时PCR结果不一致，建议多方法多试。 一般情况下，不均匀是由于样品量不一致而产生的，轻微的差异是由于实验误差造成的。 实时荧光定量PCR技术，又称实时定量荧光PCR，是指

2.更换内部参数：如果使用的内部参数不一致，可以尝试更换其他内部参数，找到更适合当前实验的内部参数。 3.检查样本elf0724消化科医生深入解答了我的一些问题2021-04-29IP辽宁辽宁收藏回复点赞

方法一：通过查找相关文献获取内部参考资料。 方法二：通过查询数据库获取内部参数。 网址：http://icg.big.ac.cn/index.php/Homo_sapiens4.总结总结，在相对定量检测中，最重要的是选择PCR产物，不要太长，一般为100-50bp。 ②降解cDNA模板，制备新模板，重复实验。③扩增效率极低，优化反应条件，尝试三步扩增程序，或重新设计引物。④反应体系存在PCR反应抑制剂。