复孔间重复性差一般会有以下两种情况: (1)CT 值很大,如 CT≥ 30,重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布,即在有效模板量很少的情况下,模板与引物的碰撞存在随机性,直接导致复孔...
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PCR的内参也要3个副孔吗吗 |
qpcr几个副孔,pcr复孔三个可以去掉一个
多个孔的较大差异可能是由于上样前移液不均匀或不同移液器吸头的差异造成的。建议在添加样品(包括内参+用途)之前使用同一移液器吸头充分混匀。 另外,30以上的目的基因的表达水平较低,而且在多个孔中更有可能出现较大差异。我不确定。现在主要做qPCR。三个二级孔的Ct值差异小于0.5:所有管头最初都需要润湿两次。液膜形成后,现在主要做qPCR。第三个二级孔的Ct值差异arywell小于0.5:所有管尖需要在开始时润湿两次才能成型
(#`′)凸 打印头安装在机架上,包含两个阀门喷射分配器和四个喷墨机。 化学和紫外线反应性水凝胶的交联可以通过动态交联喷雾器或光纤紫外线来实现。 可更换加热基板平台可搭配SBS格式微波炉板(6、12、24、48,可以,但不要告诉教练
我目前正在做qPCR,引物特异性没有问题。目前是二孔,重复的CT值相差太大。请同志们帮忙。据我所知,我现在做的是20ul系统,总混合溶液,然后每个样品混合所有溶液,涡旋5秒,吹动移液器尖端。我知道怎么做。3个生物重复是3exp实验重复(每次的样本都不同),3个技术重复是一个实验中的每个样本。 重复三个次要孔。 未来92022-06-06有帮助嗯,对于qRT-PCR,必须一次反应
8.二孔,二孔,二孔! 每个RT-qPCR样本最好做3个二级孔。为了防止人为操作不当,导致二级孔值不准确,我们可以把不准确的孔去掉,剩下的两个孔用于实验数据。 一般建议阳性结果(科研)调整在15-30之间,阴性对照Ct>35,内参基因一般小于20,样本间内参Ct值差异不超过1,说明内参基因表达稳定,重复孔的Ct值标准差不超过0.5.
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标签: pcr复孔三个可以去掉一个
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