pcr高保真酶和普通taq酶,pcr体系中taq酶过多有何影响

什么时候用高保真酶 2024-01-08 18:47 598 墨鱼

什么时候用高保真酶

pcr高保真酶和普通taq酶,pcr体系中taq酶过多有何影响

一般常用的Taq酶可分为两类：rTaq酶和LTaq酶。LTaq酶比rTaq酶具有更强的保真度和更好的耐热性。 PCR高保真酶PCR反应的保真度一般由Taq酶和反应的循环数决定。一般保真度高于PfuDNA聚合酶，约为Taqenzyme的50倍。优化的PCR反应缓冲液使其扩增速度达到Taqenzyme的2倍，Pfuenzyme的6倍，达到100~138bp。 /第二，短时间内即可得到高产的扩增产物，特别适合

目前市场上有两种产品，一种是混合高保真酶，将具有校对活性的酶混合在一起，另一种是普通Taq酶（用于提高扩增效率）。错配率为8-9X10-6碱基/循环。 Clontech高保真Taq酶的下游应用主要用于基因筛选、测序、突变检测、分子诊断等。用户对PCR保真度往往有很高的要求。保真度的共同标准是匹配率。错配率越低，保真度越好。更好。普通Taq酶的错配率为2-

最近在做RT-PCR，在摸索退火温度的时候，用的是普通的Taq酶，由于碱基配对的准确度要求比较高，所以后来用了高保真酶来做。在同样的温度下，我用普通的Taq酶扩增高保真酶，比Taq酶的错误率要低很多，代价是条件很严格，不容易被淘汰。，但是噘着嘴基本上不会出错。天一湖医生2022-06-09如果有助于放大>5000bp的片段。建立

[PCR、RT-PCR、质粒构建、帮助]PCR时使用普通Taq酶，为什么用高保真酶替代后，在相同循环条件下不能产生条带？答案其实是在实验中经常遇到各种问题。普通YAP酶和高保真酶的区别在于：普通TAP酶可以扩增100个碱基，而高保真酶的延伸效率较差。一般来说，1分钟只能扩增50个左右的碱基。 TAP酶是从水生栖热菌中分离出来的热稳定性DNA聚合酶。

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