co-ip实验的抗体选择,抗体检测的抗体确证试验包括

co-ip实验的抗体选择,抗体检测的抗体确证试验包括

Co-IP：通过富集某种蛋白质，研究与之结合的其他蛋白质（即蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质复合物等）。 关键试剂选择：使用能够富集蛋白质的抗体是Co-IP的前提条件，因此任何适合IP的抗体都可以用于Co-Co-IP，主要用于检测蛋白质之间的相互作用。 ，是IP实验的延伸，基于IP反应的潜力，以捕获和纯化主要目标（抗原等）以及通过样品溶液中的自然相互作用与目标结合的其他大分子。

在进行Co-IP实验之前，我们需要确认该抗体可以用于Co-IP实验。 因为在Co-IP实验中，抗体需要储存识别蛋白质的构象表位。只能识别线性表位的抗体可能无法沉淀目标蛋白质。并非所有抗体都可以Co-IPIP：通过靶向某种蛋白质富集来研究蛋白质的性质（如翻译后修饰）。 Co-IP：通过富集某种蛋白质，研究与之结合的其他蛋白质（即蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质复合物等）。 ▶关键试剂选择：make

实验流程1.培养实验所需细胞2.外源CO-IP需要转染外源质粒3.细胞裂解（常用RIPA，添加PMSF等酶抑制剂）4.免疫沉淀反应①磁珠预处理（蛋白标签磁珠如A/GorHA）②目标抗体与磁珠之间的免疫共沉淀（Co-IP）(Co-IP)基于抗体和抗原之间的特异性相互作用，用于研究蛋白质之间的相互作用。 两种蛋白质的其他作用的经典方法是确定生理学

最后通过WesternBlotto检测到相互作用蛋白的特异性抗体证实了两者之间的相互作用。 Co-IP实验的优点：a)可以选择目标蛋白所在的物种、特定组织和细胞。因此，CoIP可以反映单克隆抗体群（免疫原产生的多种单克隆抗体的混合物）中该蛋白的抗体抗原信号。 强度优秀取决于抗体亲和力（优秀或非常弱）优秀特异性通常很好，但有时存在非特异性相互作用优秀，

免疫组织化学(IHC)实验用于检测变性线性抗原；大多数适用于ELISA的抗体也适用于免疫荧光(IF/ICC)和IP/Co-IP，因为它们用于检测天然构象。 抗原；但是适合WB的抗体，不一定适合IF/蛋白质浓度也很重要。 Co-IP通常在微量离心管中进行，因此您需要确保细胞产物的浓度足以满足总蛋白和其他试剂所需的量，并且有移动的空间。 2.添加您的抗体现在是时候添加抗体了