pcr复孔之间不能超过,pcr引物加多了有没有影响

pcr复孔之间不能超过,pcr引物加多了有没有影响

可以，但不要告诉老师0.5。如果SD值大于0.5，则需要再次运行。系统已设置好以添加样品。最好不要将移液枪垂直上下倾斜。如果添加系统时有八通道枪，请使用它。它会起作用。 减少错误。 DNA量少，枪尖直接接触孔底。

我们组首先将充分混合的混合系统添加到96孔板中，而无需更换移液器吸头。 然后添加模板并更改每个孔的枪尖。 加PCR时要注意枪头是否插紧，并且要慢吸、慢打，一定要打干净。 这样，多孔之间的距离基本不会超过0.5。 需要酶灭活：需要更换酶，或者同时使用新酶，分析是否因酶活性损失或不足而导致假阴性。 引物：引物质量、引物浓度以及两个引物的浓度是否对称，这些都是导致PCR失败或扩增条带不合格的原因。

PCR是聚合酶链式反应的缩写，是一种用于扩增和检测DNA片段的技术。 "PCR三重井"通常是指PCR反应中一个样品所需的三个反应器，每0.5，SD值大于0.5，需要重新运行。系统准备好，样品添加。最好不要将移液器直上直下倾斜。 是的，添加系统时，如果有八通道枪，就用八通道枪，这样会减少误差。DNA量少，枪头直接接触孔。

理论上，重复孔之间的最大CT值不能超过1。如果超过，则说明你的加样过程有问题，数据肯定不准确。如果不超过1，实时荧光定量PCR（RT-PCR）的数据自发明以来已经使用了30多年。 ，聚合酶链反应（PCR）已成为分子生物学家的一项主要技术。 它不可或缺的秘密在于简单性和多功能性。 这项技术的许多变体已经被开发出来

可能原因：采样错误；标准品降解；模板浓度或抑制剂过高；引物或探针不良；PCR酶灵敏度低和活性降低。 解决方法：加入标准样品体积至2ul以上，预混引物，分双孔，定期校准移液器，尽量选择1.细胞是否充分裂解：密封培养板，用显微镜观察细胞状况是否符合实验要求。 通常细胞看起来不完整