qpcr重复孔差异一般在多少,qpcr三个复孔CT值允许误差

qpcr必须是三个复孔吗 2024-01-08 18:46 988 墨鱼

qpcr必须是三个复孔吗

qpcr重复孔差异一般在多少,qpcr三个复孔CT值允许误差

多孔间重复性差一般出现在以下两种情况：（1）CT值很大，如CT≥30，重复性差属正常现象。这种现象符合泊松分布，即当有效模板量很少时，模板与引物的碰撞是随机的，直接导致出现多个孔洞（理想的技术重复Ct值差异在0.5以内）。生物重复性差的原因及解决方案1.样品处理与采样A.采样不严格，基因表达具有时间和空间特异性，不同样品的采样部位相同处理下采样次数不同

rt，我用八管进行qPCR，连续打了4次96孔，每次很多重复孔的cq值差异都大于1，我明天交数据，看到重复孔的差异我真的睡不着。！我想不通，推测原因如下：1.每孔加2ulcDNA。一般推荐使用cDNA。阳性结果（科研）调整在15-30之间，阴性对照Ct>35，内参基因一般小于20。且样本间内参Ct值差异不超过1，表明内参基因表达水平稳定，重复孔Ct值标准差不超过0.5。

（°ο°） ▲图2.96孔重复扩增曲线，CqMean=19.1，CV=0.002来源：AzureCielo™实时荧光定量PCR系统3.再现性（Reproducibility）是指不同批次之间或不同实验室之间结果的变化，通常通过SD或RT，使用连续8管进行qPCR，并在96孔中连续进行4次。许多重复孔的值差异大于1。数据将于明天提交。看到复合孔中的差异真是让人昏昏欲睡！我不太明白，所以我推测以下原因：1.每个孔

ˋ△ˊ 是的，首先qPCR不是很准确，尤其是对于新手来说。其次，只有三个或更多平行才能具有统计意义，并且三个以上的生物学重复才可以具有生物学意义。（发表文章时需要）最好设置三个重复的孔，以便可以重复相同的实验，而不是仅仅打孔或离心，然后在添加样品后混合。当我开始进行qPCR时，重复孔之间存在很大间隙，因此我进行了检查。

后台-插件-广告管理-内容页尾部广告（手机）

标签： qpcr三个复孔CT值允许误差