标准曲线 可以用PCR- ELISA法 作。 具体如下: PCR-ELISA法: 利用 地高辛 或 生物素 等标记 引物 ,扩增产物被固相板上特异的探针所结合; 再加入抗地高辛或生物...
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qpcr的结果怎么看 |
qpcr与wb结果不一致,qpcr数据怎么辨别真假
╯^╰ 不同细胞系中微管蛋白的表达水平很可能不同。建议尝试多种内参,包括GAPDH等。 也可以做qPCR。可能原因:1)目的蛋白量不足;2)缓冲体系错误;3)RNA探针与蛋白的亲和力本来就低。解决办法:1)增加蛋白上样量;2)采用低盐体系。 ;3)添加交联剂3.WB信噪比高的可能原因:1)阳
ˋ0ˊ ☆不知道如何分析实验结果? ☆不知道实验中使用的套件? ☆不知道如何解决实验中的难题? 各种实验都是令人困惑的,尤其是对于新手来说,他们很困惑,不知道从哪里开始。如果他们能有一套可靠的转录组测序,他们往往会使用QPCR来验证结果。 然而,验证结果往往存在一致的上调和下调趋势的基因表达。 我们先来分析一下两者不一致的原因。 1.原因可能包括:1)样本比较
RT-PCR和WB结果的变化趋势并不总是一致,这可以从以下几个方面来解释:1.基因表达分为转录和翻译两个水平,即mRNA水平和蛋白质水平。 真核基因表达的转录和翻译结果不一致有两种可能。WesternBlot蛋白表达和QPCR基因表达结果:1)实验技术没有问题:客观上确实不一致,可能存在翻译后调控或修饰? 2)实验技术存在问题:客观上应该是一致的,
造成这种不一致的原因可能是在不包含P2Y6的组织中,仍然存在其他可以被抗体识别的抗原。 图3.三种不同P2Y6抗体的特异性检测[2]因此,W的结果有时不太可靠,所以不推荐。W本身只是放大信号来检测。如果太饱和,则看不到差异。PCR是的,循环次数太多,看不到橡胶亮度的差异。就像小鹿染斑竹20的反应21-11-2923:18:50是的,WBit会自行放大信号来检测它。
那么,在实时荧光定量PCR和WB中,内参如何纠正上样误差呢? 通过上面的解释,大家应该都明白了。 我再总结一下,可以说是样本加载错误导致了实验组错误。当然,你的WB结果不一定是正确的。 抗体是最不可靠的试剂之一。其用途与条带大小一致,有时可能是混合条带。
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